13.什么原因導致柱效（理論塔板數）下降？
與色譜柱相關的原因：
(1)色譜柱中間出現間斷;處理方法:使用類似的填料填充空隙或更換色譜柱
(2)保護柱無法再用;處理方法:更換保護柱
(3)其他可能的原因：柱外體積大、進樣的樣品量大、樣品溶劑強度比流動相大、流動相的改變。
14.改變填料孔徑大小對液相色譜分離有什么影響？
填料孔徑越小，允許的流動相線速度越高。最佳流動相線速度取決于固定相的顆粒大小。在最佳線速度時，色譜柱生成的理論塔板數最多。對于內徑為 4.6mm 的色譜柱，10um 的顆粒流動相線速度為 0.75ml/min 或 5um 的顆粒流動相線速度為 1.5ml/min 時，塔板數最多。
15.改變色譜柱直徑對液相色譜分析有什么影響？
如果色譜柱直徑減半，則靈敏性增加四到五倍（假設進樣量不變）。例如，等量的樣品進樣到內徑為 2.1mm 的色譜柱比進樣到內徑為 4.6mm 的色譜柱所生成的峰高 5 倍左右。 只要線性流動保持不變，則柱效率、理論塔板數、反壓和分析時間等參數均與色譜柱內徑的減小無關。
16.改變填料顆粒大小和色譜柱的長度對液相色譜分離有什么影響？
如果填料顆粒大小減半，則理論塔板數加倍（假設柱長不變）。如果填料顆粒大小減半，則柱壓增加為原來的四倍。 如果柱長加倍，則理論塔板數加倍。如果柱長加倍，則分析時間加倍。隨著柱長增加，柱壓也線性地增加。 以下是一個根據上述信息選擇色譜柱的示例： 一個裝填 10um 填料的長度為 200mm 的色譜柱可生成 6000 塊理論塔板，這是在很多情況下能提供比較適當的分離的色譜柱效率。將顆粒大小由 10um 減小到 5um，柱長仍為 200mm，則可生成 12000 塊理論塔板。然而，這個色譜柱可生成相當于原來四倍的柱壓。通常情況下不需要生成 12000 塊塔板，因此柱長可減半至 100mm，結果生成 6000 塊塔板，同時分析時間也縮短一半；柱壓僅比最初裝填 10um 填料的長度為 200mm 的色譜柱高兩倍。
17.能否提供一種與我使用的LC色譜柱相同的色譜柱？
即使用同一種固定相，不同廠商的液相色譜柱也可能具有不同的保留時間。 雖然這里提供了一些不同廠商的色譜柱的參考數據，但這些數據在不同的色譜條件下會有所不同。我們通常根據您的應用情況，向您推薦一種其它的色譜柱。在此之前，我們需要您提供以下信息： 樣品的詳細信息（樣品的成分和要分析的成分）； 是否可以接受液相色譜條件的改變； 能否對您的方法進行一些調整。 如果您不能接受分析條件和/或保留時間的改變，則應該繼續使用目前的色譜柱。
18.如何選擇液相色譜保護柱？
保護柱的作用是用來防止分析柱被一些微粒物質堵塞,及在色譜柱上強吸附組分在色譜柱上吸附。為防止樣品的雜質不進入色譜分析柱,不出現不必要的峰展寬，保護柱與分析柱的體積比應在 1:15 至 1:25 之間。 在理想的情況下，保護柱的填料應與分析柱相同，以確保得到分析柱較好的色譜圖。盡量使保護柱與分析柱近似。在我們的目錄里，將分析柱和與其配套的保護柱列在一起。
19.色譜圖上出現鬼峰。如何消除？
可能的原因有：
(1)上次進樣遺留組分產生
(2)有污染
(3)有氣泡
(4)色譜柱問題
(5)保護柱失效
建議用戶:
(1)做樣品后應保證有足夠時間沖洗色譜柱,。有必要的話在運行結束后使用更強溶劑沖洗色譜柱。
(2)洗脫原色譜柱中的原有污染。
(3)為確保系統中沒有氣泡，只使用徹底脫氣后的溶劑。
(4)更換色譜柱。
(5)更換保護柱。
(6)檢查流動相純度。
(7)檢查樣品中的其他成分。
20.我的色譜圖上的峰有拖尾現象。如何改善峰形？
可能的原因：
(1)系統內的死體積大
(2)樣品在色譜柱上有吸附
(3)色譜柱使用時間很長
建議用戶：
(1)盡量減少流動相管線的死體積，確保管線接頭的連接合適減小死體積，由于不同生產廠家的管線的接頭和密封墊圈有可能不一樣，盡量使用安捷倫公司的管線接頭和密封墊圈。
(2)使用洗脫更強的流動相
(3)更換新色譜柱
21.什么原因導致基線波動？
基線波動有可能與實驗室的溫度及濕度變化有關系。需確保室溫及濕度穩定，將儀器從通風櫥中取出，并將色譜柱和毛細管進行隔熱保溫。
22.什么原因導致基線毛刺？
這很有可能是流動池內有氣泡。請先停泵來進行確認,如果毛剌消失，則很有可能是由于流動池內有氣泡。需要沖洗流動池。如果毛剌仍然存在，則需檢查檢測器本身的電噪音有關。如果需要更多幫助，則請致電安捷倫科技公司。在中國，請撥打800 820 3278。
23.如何減少基線噪音？
無規律噪音可能與污染有關。請沖洗色譜柱，對樣品做合適的前處理以避免污染，并使用 HPLC 級別的溶劑。 連續噪音有可能由檢測器或泵造成。要確定問題是否發生在檢測器還是在泵，請先關泵停掉流量，監測基線。如果此時基線平穩，則噪音可能與泵有關系。使用 ChemStation 在線診斷或 LC 手持控制器檢查泵方面的故障。如果停泵后噪音繼續存在，則說明噪音與檢測器有關。首先，請嘗試更換燈。如果問題依然存在，則請與安捷倫科技公司聯系。
24.如何避免液相基線飄移？
基線向上飄移表明系統中有污染。請沖洗色譜柱，凈化樣品，然后使用新溶劑。 向下飄移通常是由于檢測室或柱箱中的溫度波動的原因。減小室溫變化，將儀器從通風櫥中取出，并將色譜柱和毛細管保溫隔熱。向下飄移也可能由于溶劑的純度不是 HPLC 級別的溶劑而且此純度低的溶劑在紫外有吸收。
25.如何排除流動相/流動池中的氣泡？
避免流動相中產生氣泡的最佳方式是將流動相經脫氣裝置進行脫氣。如果沒有脫氣裝置，則可以在流動相溶劑瓶中通入氦氣進行脫氣。也可以在檢測器的出口端加一根細管線以調節流動池中的背壓，但必須注意不要超過流動池的最大壓力，否則會造成流動池漏液或流動池損壞。 如果流動池中出現氣泡，則先摘下色譜柱，用一根管線直接將流動相接入檢測器的入口。將異丙醇以較大的流速注入流動池。 直到基線上看不到尖峰為止。氣泡就應該清除掉了。
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